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pcr目的条带出现杂带,是什么原因 做western显影出现很多杂带是什么原因

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pcr目的条带出现杂带,是什么原因 做western显影出现很多杂带是什么原因 杂带红线上条带应该是目的条带(目的基因引物是生工免费合成的)出现的位置(从左到右梯度50,52,54,55,56,58),但是目的基因杂带太多了。为了说明操作没有问题,图中红箭和圆圈头分别是我们课题组前期已经证实好用的另一基因和GAPDH内参,另一基因

Western Blot中杂带较多有哪些原因?1、封闭问题,可以选择牛奶封闭,并且封闭时间可以延长,4℃过夜都是可以的。 2、抗体的非特异性过高,选择特意性强的抗体,单克隆抗体比多克隆抗体好。 3、蛋白质降解。 4、蛋白质亚型也一起曝出来。

western blot出现很多杂带,求助,交流1因为WB的一抗识别的蛋白质的表位是顺序表位,不是空间表位,所以WB状态下的抗原-抗体识别,与非变性的生理条件下的抗原-抗体识别不同。 2WB之前,先用分子筛纯化同时也是检测一下目的蛋白产物是否成功。也就是目的蛋白是否成功表达了,而且在

western blot 杂带及背景脏问题。目的蛋白(红箭头)26kd。加样5ul,电泳80v30min;100v1h。转膜100v90mi先说这个实验总体的背景,有黑点,这种背景非常像封闭液没有完全溶解带有杂质,或者是容器没洗干净,有脏东西了,最好把封闭液用022um的膜过滤一下再做。然后其他器皿都洗刷干净。洗液里面加点tween试试。 再一个看条带,感觉特异性不太好,条

DNA 琼脂糖凝胶电泳 出现杂带是什么原因琼脂糖凝胶电泳负极极 电泳:加凝胶板立即通电进行电泳,电压60-100V,品由负极(黑色)向极(红色)向移电压升高,琼脂糖凝胶效离范围降低溴酚蓝移距离胶板沿约1cm处,停止电泳

PCR总是有杂带怎么消除可以小幅提高退火温度,大概1-2度,这样可以增加引物结合的准确性。如果没有用,建议用BLAST检查一下引物的序列是否在基因组内其他位置有相似序列。 如果杂带无论如何也无法消除建议重新设计引物,或者使用切胶的方法提纯

PCR产物杂带很多,如何解决(产物杂带,杂带,温在你现有的退火温度上各增加三度,降低三度,都去试一下先;如果杂带的长度比目的带长的话,就适当缩短退火和延伸时间。

做western显影出现很多杂带是什么原因有很多种原因,举例如下: 1抗体浓度过高 2SDS造成非特异性结合 3 二抗试剂的非特异结合 4一抗特异性差 推荐采用已经经过厂家验证的WB应用抗体,有图有真相像义翘的WB抗体一样,用起来才放心。 另,最好放上自己的实验条件和结果图片,可以

为什么电泳有杂带,而测序只有一个目的基因你说的这个杂带有可能根本就不是在PCR扩增中产生的哦,所以测序只产生你目的基因的信息。是不是反转后cDNA模板浓度太高导致呢? 你可以将杂带回收,作为模板看能不能扩增出来相同大小的带,如果不能说明是人为引入的,测序因为不能和引物结合所

pcr目的条带出现杂带,是什么原因红线上条带应该是目的条带(目的基因引物是生工免费合成的)出现的位置(从左到右梯度50,52,54,55,56,58),但是目的基因杂带太多了。为了说明操作没有问题,图中红箭和圆圈头分别是我们课题组前期已经证实好用的另一基因和GAPDH内参,另一基因

PCR只有杂带,没有目的条带如题,进行1200bp的PCR扩增,一直没有看到目的条带,只有杂带,是什么问1200bp 这么长的片段,很难P出来的啊~ 12k叫很难P 开玩笑 第一我想说12K不难P的 我觉你这种情况就是用降落PCR也没用 降落PCR 一般是老P不到东西 就是没有杂带也没有主带 摸摸条件 你有杂带没主带是不能用的 你说你老P不到 先检查下引物设计